⑵桑格反应(DNFB反应、FDNB反应)
见图 桑格反应的反应式
α-AA与2,4二硝基氟苯(DNFB)或1—氟—2,4二硝基氟苯(FDNB)在弱碱溶液中反应,α-AA变为黄色的2,4-二硝基苯基衍生物,称为DNP-AA。
应用:用于鉴定多肽链的N末端的AA。先将FDNB与多肽N端缩合,再水解N端黄色化合物DNP-AA,然后层析、分离、鉴定N端的第一个AA种类。
用于鉴定多肽链的氨基末端的氨基酸。
⑶艾德曼Edman反应(PITC反应)
见图 艾德曼Edman反应的反应式
α-AA上的α-NH2与苯异硫氰酸(PITC)反应,生成苯氨基硫甲酰AA衍生物(PTC-AA),再在弱酸(甲酸、FH)条件下发生分子重排,生成苯乙内酰脲衍生物(PTH),PTH无色,但易用层析法分离后显色鉴定。
应用:用于鉴定多肽链的氨基末端的氨基酸,“多肽顺序自动分析仪”测定氨基酸顺序就是利用该原理。
⑷与丹磺酰氯的反应(DNS反应)
α-AA上的α-NH2与丹磺酰氯DNS反应,生成DNS-AA,有荧光,可用荧光分光光度计快速检出,故也可鉴定N端AA。