随着2014年临床助理医师考试的时间越来越近，参加考试的考生们都在紧张的复习，在此为参加2014年临床助理医师考试的考生们搜集整理了临床助理医师复习资料，希望对考生们有所帮助。

一、标本的采集与送检(principleofcollectionspecimen)

1、采集急性期标本

2、污染标本应用抗生素抑制标本中细菌或真菌的生长

3、低温保存，快速送检

4、血清学实验检查抗体(双分血清)

二、病毒的分离培养与鉴定

(一)病毒的分离培养

??动物接种选择易感动物及接种部位，观察发病情况

??鸡胚培养不同病毒选择不同接种部位(绒毛尿囊膜，尿囊腔，羊膜腔，卵黄囊)，分离流感病毒最常用。

??细胞培养：分离病毒最常用的方法

(1)原代细胞—来源于动物、鸡胚、人胚组织细胞，对多种病毒敏感，但只能传2-3代。

(2)二倍体细胞—在体外分裂50-100代后仍保持2倍体染色体数目的单层细胞。

(3)传代细胞—能在体外无限传代的细胞多由癌细胞或二倍体细胞突变而来。

病毒在培养细胞中增殖的指标：

??细胞病变效应(CPE)：即某些病毒在细胞内增殖引起的特有的细胞病变(细胞变圆、聚集、坏死、脱落等)

??红细胞吸附

??干扰现象

??细胞代谢改变(pH)

(二)病毒的鉴定

核酸类型、理化性状、形态、血清学鉴定、基因测序和生物对比。

(三)病毒的数量与感染性测定

1.50%组织细胞感染量

2.红细胞凝集试验

3.空斑形成试验

三、病毒的血清学诊断

用已知病毒抗原检测病人血清中相应抗体以诊断病毒性疾病(中和实验、补体结合实验、血凝抑制实验、凝胶免疫扩散等)。

四、病毒的快速诊断

(一)形态学

电镜和免疫电镜——直接观察病毒

光镜——大病毒和包涵体

(二)检测病毒蛋白抗原

用已知特异性抗体直接检测病毒蛋白抗原(简便、敏感、特异)

常用方法：免疫荧光技术(IF)

固相放射免疫测定(SPRIT)

酶免疫技术(EIA)等。

(三)检测病毒特异性IgM抗体

检测病毒特异性IgM抗体可诊断急性感染或证明病毒**。

(四)检测病毒的核酸

1核酸杂交

–斑点杂交(dothybridization)

–原位杂交(insitehybridization)

–DNA印迹杂交(Southernblot)

–RNA印迹杂交(northernblot)

2核酸扩增

–聚合酶链反应(polymerasechainreaction，PCRDNA)

–连接酶链反应(ligasechainreaction，LCR)

–反转录PCR(ReversetranscrptasePCR，RT—PCR(RNA)

3基因芯片技术(genechip)

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