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什么是细胞免疫测定法(2)

2010-12-14 09:25阅读: 来源:责任编辑:爱医培训
[导读] 微量淋巴细胞毒试验 用已知的单价 HLA抗原特异性抗血清测定淋巴细胞表面是否具有相应的 HLA抗原的方法。先使细胞、抗体和补体在一定温度条件下作用......

  嗜碱粒细胞脱粒试验  协助临床诊断速发型超敏反应的体外试验。血液中的嗜碱粒细胞和组织中的肥大细胞内部充满含有组织按、5-羟色胺等活性介质的颗粒,而表面上则存在有与过敏抗体FC段结合的受体,当过敏抗体结合到细胞表面上而使细胞致敏时,如果再加入相应的过敏抗原,两者结合可使细胞脱出颗粒并释放活性介质,从而引起速发型超敏反应。

  过敏抗体有两类:一是过敏反应的lgE类抗体,能与大白鼠腹液中的肥大细胞结合;另一是过敏反应的lgG类抗体,可与家兔血中嗜碱粒细胞结合。

  试验方法有①直接法:取病人外周血中的嗜碱粒细胞,加上可疑的相应抗原;②间接法:用家兔血中的嗜碱粒细胞或大鼠腹腔液中的肥大细胞,加上病人的血清和可疑的相应抗原。当过敏抗原与过敏抗体相结合时,细胞中的颗粒便被脱出。可用中性红或詹纳斯绿作超***染色镜检,计算脱粒的细胞数,借以观察被试人血清中有无过敏抗体。

  组织定型试验  在组织移植中,测定供者和受者有核细胞表面组织相容性抗原的种类及其相容程度的方法。在同种异体间进行组织或脏器移植之前,先作组织相容性抗原(人白细胞抗原HLA)的检查,了解供者与受者之间的组织相容程度,选择最合适的供者,可提高移植的成功率。

  微量淋巴细胞毒试验  用已知的单价 HLA抗原特异性抗血清测定淋巴细胞表面是否具有相应的 HLA抗原的方法。先使细胞、抗体和补体在一定温度条件下作用一定时间,然后检查细胞的活存数。将供者和受者的淋巴细胞分别加入标准的抗HLA血清,再加入家兔的补体,然后加入伊红染料镜检。如果淋巴细胞肿大,染成深色,呈现死亡状态,即表示该淋巴细胞具有这种HLA抗原。反之,如果淋巴细胞未被杀死,活存细胞保持着较小体形,呈光亮的正常形态,即表示不含有该种HLA抗原。在进行交叉配型时,可采用同样的操作方法,给供者的淋巴细胞加入受者的新鲜血清(抗HLA血清),如果受者的血清使供者的淋巴细胞死亡,即表明受者的血清中存在抗供者的组织细胞抗体,供者和受者之间的组织相容性程度差,不能选作移植供者。

  组织相容性配合试验  测定受者与供者组织相容性抗原总量有无差异或相似程度的方法。体外试验应该采用混合淋巴细胞培养的方法。双向法是将供者和受者的淋巴细胞混合培养,如果二者的组织相容性抗原不相容,就会发生相互间的**,使双方淋巴细胞出现母细胞转化。单向法是将供者的淋巴细胞先用丝裂霉素或 X射线处理,使其失去转化和合成DNA的能力,但仍保持能够**对方细胞发生转化的抗原特异性,然后,将处理过的供者淋巴细胞与未处理过的受者淋巴细胞混合培养,如果出现转化,即为阳性反应,表明二者的组织相容性抗原不相符合。凡有亲缘关系的,呈弱阳性反应;凡是组织相容性抗原有很大差异的,呈强阳性反应。

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