四、黄酮的提取

　　黄酮类化合物在花、叶、果等组织中，一般多以苷的形式存在，而在木部坚硬组织中，则多以游离苷元形式存在。

　　黄酮苷类以及极性稍大的苷元（如羟基黄酮、双黄酮、橙酮、查耳酮等），一般可用丙酮、乙酸乙酯、乙醇、水或某些极性较大的混合溶剂进行提取。其中用得最多的是甲醇一水（1：1）或甲醇。一些多糖苷类则可以用沸水提取。在提取花青素类化合物时，可加入少量酸（如0.1％盐酸）。但提取一般黄酮苷类成分时，则应当慎用，以免发生酸水解反应。，为了避免在提取过程中黄酮苷类发生水解，也可按常规提取苷的方法事先破坏酶的活性。大多数黄酮苷元宜用极性较小的溶剂，如用***、**、乙酸乙酯等提取，而对多甲氧基黄酮的游离苷元，甚至可用苯进行提取。

　　对得到的粗提取物可进行精制处理，常用的方法有：

　　（一）溶剂萃取法

　　利用黄酮类化合物与混入的杂质极性不同，选用不同溶剂进行萃取可达到精制纯化目的。例如植物叶子的醇浸液，可用石油醚处理，以便除去叶绿素、胡萝卜素等脂溶性色素。而某些提取物的水溶液经浓缩后则可加入多倍量的乙醇，以沉淀除去蛋白质、多糖类等水溶性杂质。

　　有时溶剂萃取过程也可以用逆流分配法进行。常用的溶剂系统有：水一乙酸乙酯，正丁醇一石油醚等。

　　溶剂萃取过程在除去杂质的同时，往往还可以收到分离苷和苷元或极性苷元与非极性苷元的效果。

　　（二）碱提取酸沉淀法

　　黄酮苷类虽有一定极性，可溶于水，但却难溶于酸性水，易溶于碱性水，故可用碱性水提取，再将碱水提取液调成酸性，黄酮苷类即可沉淀析出。此法简便易行，如芦丁、橙皮苷、黄芩苷的提取都采用了这个方法。现已从槐米中提取芦丁为例说明该法的操作过程。槐米（槐树．so-phora Japonica L．的花蕾）加约6倍量水，煮沸，在搅拌下缓缓加入石灰乳至：pH 8～9，在此pH条件下微沸20～30分钟，趁热抽滤，残渣再加4倍量的水煎煮一次，趁热抽滤，合并滤液，在60％～70℃的条件下，用浓盐酸将合并滤液调至pH为5，搅匀后静置24小时，抽滤，得沉淀物。用水将沉淀物洗至中性，60℃干燥得芦丁粗品，用沸水重结晶，70℃～80℃干燥后得芦丁纯品。

　　在用碱酸法进行提取纯化时，应当注意所用碱液浓度不宜过高，以免在强碱性下，尤其加热时破坏黄酮母核。在加酸酸化时，酸性也不宜过强，以免生成锌盐，导致析出的黄酮类化合物又重新溶解，降低产品收率。当药材中含有大量果胶、黏液等水溶性杂质时（如花、果类药材），宜用石灰乳或石灰水代替其他碱性水溶液进行提取，以使上述含羧基的杂质生成钙盐沉淀，不被溶出。这将有利于黄酮类化合物的纯化处理。

　　（三）炭粉吸附法

　　主要适于苷类的精制工作。通常，在植物的甲醇粗提取物中，分次加入活性炭，搅拌，静置，直至定性检查上清液无黄酮反应时为止。滤过，收集吸附苷炭末，依次用沸水、沸甲醇、7％酚一水、15％酚一醇溶液进行洗脱。对各部分洗脱液进行定性检查（或用Pc鉴定）。通过对Baptisia lecontei中黄酮类化合物的研究证明，大部分黄酮苷类可用7％酚一水洗下。洗脱液经减压蒸发浓缩后，再用**振摇除去残留的酚，余下水层减压浓缩即得较纯的黄酮苷类成分。