龋病的实验室预测(口腔预防)
实验室预测 以致龋菌及酸性产物为指标,检测龋发生危险因素的试验称龋活性试验。目前较成熟的方法如下:
(1) Dentocult SM试验
目的:以观察唾液中每毫升菌落形成单位(CFU/ml)的变形链球菌数量来判断龋的活性。
试剂盒:含有轻唾选择培养液的5ml带螺帽的培养试管、标准的塑胶附着板、杆菌肽纸片及石蜡。
检测方法:先令受试者咀嚼一粒石蜡丸1分钟后,持附着板在舌背部翻转涂抹10次,立即将板放置培养试管内,旋上螺帽,37℃,48小时培养后,计数在附着板上的变形链球菌落(蓝色)密度情况。
结果判断:分四级:"0和1"<105;"2"< 105~106;"3">106."3"为高龋的活性。
(2) Dentocule LB试验
目的:主要观察乳杆菌在唾液的数量。
试剂盒:含乳杆菌固体培养基试板,带螺帽培养管。
检测方法:受试者先咀嚼石蜡丸1分钟后,收集唾液于容器内,再将唾液均匀浇在培养板上的培养基表面,悬去多余唾液,放置培养管内,35℃4天培养,计数培养板上附着乳杆菌菌落密度。
结果判断:1 000/ml( 103 CFU/ml)、10 000/ml( 104 CFU/ml)、100 000/ml (105CFU/ml)、
1000000/m1(106 CFU/ml)。>10 000/ml(104 CFU/ml)为高龋的活性
(3) Cariostat试验
目的:检测牙表面菌斑内产酸菌的产酸能力。
试剂盒:含溴甲酚紫及溴甲酚绿的液体培养管、标准棉签。
检测方法:用标准棉签涂擦一侧牙颊面菌斑4~5次,将棉签放置培养管内,37℃48小时培养,观察培养液颜色变化。
结果判断:蓝紫色(-);绿色(+);黄绿色(++);黄色(+++)。(++)培养管内pH 5.0~5.5为危险龋活性,(+++)为明显龋活性。
(4) Dentobuff St**试验
目的:了解唾液的缓冲能力。
产品:黄色试条。
方法与原理,.将含指示剂的黄色酸性试条浸受试者唾液后,可使酸性试条pH提高,则试条变为蓝色,说明唾液一定缓冲能力。
结果判断;用试条浸受试者唾液(操作似pH试纸的使用)。试条从黄色变为蓝色,表示pH >6.0说明唾液有缓冲能力,颜色不变则缓冲能力差。
(5)刃天青纸片法
目的:用颜色显色法观察唾液内变形链球菌的数量。
试剂盒:直径8mm,含刃天晴、蔗糖及聚乙醇酯圆纸片,2个聚乙烯薄膜。
方法及原理:刃天青是氧化还原指示剂,变形链球菌与纸片上的蔗糖发生氧化还原反应强弱,显示不同的颜色反应。方法是用纸片浸受试者唾液,除去多余唾液,将纸片放在2个聚乙烯薄膜间压紧,放在受试者腋下夹紧(约32℃)15分钟,观察结果。
结果判断:纸片蓝色(-);紫蓝色(+);红紫色(++);粉色(+++);白色(++++)。
粉色(+++)以上为龋活性。
(6)定量PCR方法:
以变形链球菌特异性引物,用定量PCR方法检测受试者唾液内变形链球菌数量判断龋活性。