常用分子生物学技术原理及其应用
    1.分子杂交与印迹技术
    （1）分子杂交在DNA变性时，如把不同DNA分子或DNA与RNA分子放在同一溶液中，只要这些核酸单链分子之间存在一定程度的碱基配对关系，就可在不同分子问形成杂化双链，这种现象称为核酸分子杂交。
    （2）印迹技术是指将在凝胶中分离的生物大分子转移（印迹）或直接放在固定化介质上并加以检测分析的技术。目前这种技术已广泛用于DNA、RNA、蛋白质的检测，分别称为DNA印迹技术（Southern印迹）、 RNA印迹技术（Northern印迹）、蛋白质印迹技术（Western印迹）。
    （3）探针技术探针是指用放射性核素或其他化合物标记的核酸片段，它具有特定的序列，能够与待测的核酸片段互补结合，用于检测核酸样品中的特定基因。
    2.PCR技术的原理与应用
    （1）定义也称聚合酶链反应，是指在体外对目的DNA进行扩增的一项技术。
    （2）工作原理以拟扩增的DNA分子为模板，以一对分别与模板5'端和3'端相互补的寡核苷酸片段为引物，在DNA聚合酶作用下，按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成，重复这一过程，使目的DNA片段得到大量扩增。
    （3）反应步骤每个循环包括变性（95℃）、NN（55℃）、延伸（72℃）三步，一般进行25-30次循环。
    （4）主要用途 目的基因的克隆、基因的体外突变、DNA和RNA的微量分析、DNA序歹测定、基因突变分析。
    （5）PCR衍生技术反转录PCR、原位PCR、实时PCR.
    3.核酸序列分析
    包括化学裂解法和DNA链末端合成终止法。目前自动分析已经替代放射手工测序。
    4.基因文库
    （1）基因文库是指一个包含了某一生物全部DNA序列的克隆群体。基因文库可分为基因组DNA文库和cDNA文库。
    （2）基因组DNA文库是指包含某一生物细胞全部基因组DNA序列的克隆群体，它以DNA片段的形式贮存着某一生物的全部基因组DNA信息。
    （3）cDNA文库是包含某~组织细胞在一定条件下所表达的全部mRNA经反转录而合成的cDNA序列的克隆群体，它以cDNA片段形式贮存着该组织细胞的基因表达信息。
    【例25】2007No171A利用聚合酶链反应扩增特并DNA序列的重要原因之一是反应体系内存在
    A.DNA聚合酶
    B.特异RNA模板
    C.特异DNA引物
    D.特异RNA引物
    参考答案：25.C