第十七章 抗生素类药物的分析

　　除一般杂质检查外，还收载有关物质、聚合物检查；异常毒性、降压物质、热原、细菌内毒素、无菌等安全性检查项目。

第一节 青霉素钠和青霉素钾及其制剂的分析
　　青霉素族中的母核为6-氨基青霉烷酸(简称6-apa)，游离羧基酸性，能与无机碱或某些有机碱成盐。β-内酰胺环不稳定，遇酸、碱、青霉素酶及某些金属离子等作用，易发生水解和分子重排，导致β-内酰胺环的破坏而失去抗菌活性。

一、鉴别
1.hplc
2.红外光谱法
3.焰色反应 钠盐火焰鲜黄色；钾盐紫色。

二、检查
1.吸收度 侧链苯环在264nm有最大吸收，而降解产物在280nm有最大吸收。测定264nm吸收度为控制青霉素钠含量。规定280nm吸收度为控制杂质**。
2.聚合物：引起过敏性休克，分子排阻色谱法检查，外标法计算
3.水分：本品遇水易水解，费休法测定水分不得超过0.5%。
4.细菌内毒素 细菌内毒素检查法。利用鲎试剂与细菌内毒素发生凝集反应，来判断内毒素是否符合规定。
5.无菌 灭活后，无菌检查法检查。

三、含量测定
反相高效液相色谱法，外标法计算含量。
使用酸性流动相使青霉素成为分子状态，利于分离。

四、注射液青霉素钠、钾
鉴别相同
检查：溶液澄清度与颜色、青霉素聚合物、水分、酸碱度、细菌内毒素、无菌

第二节 阿莫西林及其制剂的分析
一、阿莫西林的分析
（一）鉴别：hplc、红外光谱法
（二）检查
1．有关物质：主要是降解产物。采用hplc法，由于种类多、极性差异大，采用梯度洗脱法。
2．聚合物：分子排阻色谱法检查
3．水分 含3分子结晶水，按费休法测定含水应为12.0～15.0％
（三）含量测定
高效液相色谱法，外标法计算含量。

二、制剂分析
有关物质限度略宽，口服制剂测定溶出度

第三节 头孢羟氨苄及其制剂的分析

一、鉴别
1.hplc 与对照品保留时间一致
2.红外光谱法

二、检查
1.有关物质 主要检查α－对羟基苯甘氨酸、7－氨基去乙酰氧基头孢烷酸及其他有关物质。采用hplc法检查。前两者用对照品比较法，其他杂质用高低浓度对比法。
2.水分 含1分子结晶水，按费休法测定含水应为4.2～6.0％

三、含量测定
高效液相色谱法，外标法计算含量。
四、制剂分析
口服制剂测定溶出度，其他与原料药同

第四节 硫酸庆大霉素及其制剂的分析
一、鉴别
1.茚三酮反应 分子中有α－羟基胺结构，可与茚三酮缩合成蓝紫色化合物。
2.薄层色谱法
3.红外光谱法

二、检查
1.水分 按费休法测定含水不得超过15.0％
2.硫酸盐 配位滴定法
先加入定量过量氯化钡滴定液，形成硫酸钡沉淀。剩余ba2 再用edta滴定液滴定。本品含硫酸盐应为32.0～35.0%。
3.细菌内毒素
4.c组分检查 hplc
庆大霉素为c组分复合物，其不同c组分活性无明显差异，但其毒副作用不同，需控制其相对含量。本品无紫外吸收，用蒸发光散射检测器检测

三、含量测定 微生物检定法

四、制剂分析
注射液检查ph值、颜色、无菌、细菌内毒素；缓释片检查释放度

第五节 盐酸四环素及其制剂的分析
一、鉴别
1.三氯化铁反应：具酚羟基和烯醇结构，与铁离子形成红色配合物
2.高效液相色谱法 供试品与对照品保留时间一致
3.红外分光光度法 测定最大吸收波长和相应吸收度
4.氯化物鉴别反应

二、检查
1.有关物质 主要是差向四环素、脱水四环素、差向脱水四环素和金霉素等。采用hplc法检查，加校正因子的主成份对照法
2.杂质吸收度 控制本品中差向异构体、脱水异构体及其他杂质。此类杂质在530nm波长有较强吸收，控制样品在530nm吸收度，达到控制杂质的目的。
3.酸度、溶液澄清度、热原、无菌

三、含量测定
hplc，外标法计算。

四、制剂分析
片剂、胶囊剂杂质限度有所放宽，需测定溶出度

第六节 罗红霉素及其制剂的分析
一、鉴别
1.hplc
2.红外光谱法

二、检查
1.碱度 测定ph值
2.有关物质 hplc，主成份自身对照法
3.水分 按费休法测定含水不得超过3.0％

三、含量测定 hplc，外标法计算

四、制剂分析
有关物质限度有所不同

【a型题】
1《中国药典》检查维生素c中铜与铁的方法是
a原子吸收分光光度法
b紫外分光光度法
c可见分光光度法
d tlc
e荧光分析法
参考答案a

2《中国药典》规定检查青霉素钠中水分的原因在于
a水分是活性物质
b水分易使青霉素发霉
c水分影响青霉素钠的质量
d水分影响青霉素钠的含量测定结果
e青霉素钠遇水可水解而失效
参考答案e

3规定检查c组分的药物是
a青霉素钾 b头孢羟氨苄
c罗红霉素 d硫酸庆大霉素
e盐酸四环素
参考答案d

4《中国药典》采用hplc加校正因子的主成份对照法进行杂质检查的是
a青霉素钠 b盐酸四环素
c阿莫西林 d罗红霉素
e头孢羟氨苄
参考答案b

5《中国药典》测定维生素b1方法是
a紫外分光光度法
b碘量法
c铈量法
d非水滴定法
e溴酸钾滴定法
参考答案d

6《中国药典》检查青霉素中聚合物的方法
a对照品比较法
b凝胶色谱法
c高效液相
d气相色谱
e紫外分光光度法
参考答案b

【b型题】
a 甲醇溶液koh b铁***
c二氯靛酚钠 d硝酸
e茚三酮
1维生素e鉴别所用试剂是
2维生素k1鉴别试剂
3维生素c鉴别试剂
4维生素b1鉴别试剂
参考答案1d 2a 3c 4b

a青霉素钾
b头孢羟氨苄
c罗红霉素
d硫酸庆大霉素
e盐酸四环素
5茚三酮反应
6三氯化铁反应
参考答案5d 6e

【x型题】
1碘量法测定维生素c注射液含量时，需用试剂有
a丙酮 b甲醛
c淀粉指示液 d稀醋酸
e碘滴定液
参考答案acde

2青霉素钠的检查项目有
a细菌内毒素 b无菌
c 聚合物 d吸收度