2011药士执业考试-生物化学蛋白质的分子结构与理化性质(4)
2011-04-12 09:13阅读: 来源:爱爱医责任编辑:爱医培训
[导读] 针对2011年执业药士资格考试最新大纲要求,对生物化学教科书中与2011药士执业考试-生物化学蛋白质的分子结构与理化性质有关的重点难点考点重新整理归纳总结
七、氨基酸顺序分析:
蛋白质多肽链的氨基酸顺序分析,即蛋白质一级结构的测定,主要有以下几个步骤:
1. 分离纯化蛋白质,得到一定量的蛋白质纯品;
2. 取一定量的样品进行完全水解,再测定蛋白质的氨基酸组成;
3. 分析蛋白质的N-端和C-端氨基酸;
4. 采用特异性的酶(如胰凝乳蛋白酶)或化学试剂(如溴化氰)将蛋白质处理为若干条肽段;
5. 分离纯化单一肽段;
6. 测定各条肽段的氨基酸顺序。一般采用Edman降解法,用异硫氰酸苯酯进行反应,将氨基酸降解后,逐一进行测定;
7. 至少用两种不同的方法处理蛋白质,分别得到其肽段的氨基酸顺序;
8. 将两套不同肽段的氨基酸顺序进行比较,以获得完整的蛋白质分子的氨基酸顺序。
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