热原检查目前各国药典仍为家兔法。
家兔法:选用家兔作试验动物,是因为家兔对热原的反应和人是相同的。具体试验方法和结果判断标准参看《中国药典2005版》二部附录。采用直肠热电偶代替直肠温度计,热电偶在整个实验中固定在直肠内,其温度可在仪表中显示出来。因而免除对单个家兔温度多次测量操作。国内四川绵阳医用电子仪器厂生产的RY型热原测试仪基本上符合这种要求,具有分辨率高,读数精确的优点,同时可测虽16只动物,能满足一般热原测定需要。
鲎试验法:利用鲎的变形细胞溶解物与内毒素之间的胶凝反应,试验时制备或购买鲎热原试剂,即送变形细胞溶解物。然后取一定量的热原试剂,加入一定量的供试品放入洁净的无热原试管中,于37℃水溶液中培爱爱医医学考试中心60分钟,观察结果。同时作阴性对照。判断如下:如试验品出现凝胶或粘稠度和不透明度增加者为阳性反应,表明供试品有热原。医学教|育网收集整理若供试品无变化或仅有絮状物者为阴性,表明供试品无热原。
有人比较兔试验与鲎试验法的灵敏性,结果说明鲎试验法能检出0.0001ug的内毒素,而兔试验法只能检出0.001ug的内毒素,故认为鲎试验比免试验灵敏十倍。鲎试验特别适用于某些不能用家免进行热原检测的品种,如放射性药剂、肿瘤抑制剂等。因为这些制剂具有细胞毒性具有一定的生物效应,用家兔检测是不适宜的。
其对革兰氏阴性以外的内毒亲不够敏感,不能代替家兔热原试验法。
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